Μυτιλήνη : Είναι βιολογικά εύλογη η μόλυνση από εμβόλια mRNA από ένα εμβολιασμένο άτομο;

 

Η εκστρατεία μαζικού εμβολιασμού κατά του COVID-19 είναι η πρώτη χρήση εμβολίων mRNA παγκοσμίως. Τα εμβόλια mRNA ταιριάζουν ακριβώς με τον ορισμό της γονιδιακής θεραπείας από ρυθμιστικούς φορείς των ΗΠΑ και της Ευρώπης. 

Οι κανονισμοί απαιτούν μελέτες απέκκρισης αυτών των φαρμάκων και των προϊόντων τους (τις μεταφρασμένες πρωτεΐνες). Αυτές οι μελέτες δεν έχουν γίνει για εμβόλια mRNA (ούτε για εμβόλια αδενοϊού). Πολλές μαρτυρίες αναφέρουν συμπτώματα και παθολογίες πανομοιότυπες με τις ανεπιθύμητες ενέργειες των εμβολίων mRNA σε μη εμβολιασμένα άτομα σε επαφή με πρόσφατα εμβολιασμένα άτομα. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικό να γίνει απολογισμός της κατάστασης των γνώσεων σχετικά με την πιθανή απέκκριση των νανοσωματιδίων του εμβολίου καθώς και του mRNA και του προϊόντος του,

Τα λιπιδικά νανοσωματίδια που φέρουν το mRNA του εμβολίου εξαπλώνονται μετά την ένεση σε όλο το σώμα σύμφωνα με τις διαθέσιμες μελέτες σε ζώα και το mRNA του εμβολίου (γυμνό ή στα νανοσωματίδια ή σε φυσικά εξωσώματα) βρίσκεται στην κυκλοφορία του αίματος καθώς και η ακίδα του εμβολίου σε ελεύθερη μορφή ή σε κάψουλα σε εξωσώματα (που αποδεικνύεται σε ανθρώπινες μελέτες). Έχει αποδειχθεί ότι τα νανοσωματίδια λιπιδίων (ή το φυσικό τους ισοδύναμο, τα εξωσώματα ή τα εξωκυτταρικά κυστίδια EVs) μπορούν να απεκκριθούν από τα σωματικά υγρά (ιδρώτας, πτύελα, μητρικό γάλα) και να περάσουν τον διαπλακουντιακό φραγμό. Αυτά τα ηλεκτρικά οχήματα μπορούν επίσης να διεισδύσουν με εισπνοή και μέσω του δέρματος (υγιή ή κατεστραμμένο) καθώς και από το στόμα μέσω του μητρικού γάλακτος (και γιατί όχι κατά τη σεξουαλική επαφή μέσω σπέρματος, γιατί δεν έχει μελετηθεί). Υπάρχει επείγουσα ανάγκη να επιβληθεί η νομοθεσία για τη γονιδιακή θεραπεία που ισχύει για τα εμβόλια mRNA και να διεξαχθούν μελέτες σχετικά με αυτό το θέμα καθώς προβλέπεται η γενίκευση των εμβολίων mRNA.

(*) Αυτό το άρθρο δημοσιεύθηκε στις 14 Νοεμβρίου 2022 στο Infectious Diseases Research υπό τον αρχικό τίτλο «Τρέχουσα κατάσταση γνώσης σχετικά με την απόρριψη του mRNA και την ακίδα που παράγεται από τα εμβόλια mRNA κατά του Covid-19. πιθανότητα μόλυνσης του περιβάλλοντος των εμβολιασμένων από αυτά τα προϊόντα»  https://doi.org/10.53388/IDR20221125022

Συντομογραφίες
– EV: εξωκυτταρικά κυστίδια ή εξωσώματα
– LNP: συνθετικό λιπιδικό νανοσωματίδιο
– PEG: πολυαιθυλενογλυκόλη
– siRNA μικρό παρεμβαλλόμενο RNA, miRNA: microRNA, έκφραση γονιδίου ελέγχου
– RBD: τομέας δέσμευσης υποδοχέα (πρωτεΐνη ακίδας)

***

Εισαγωγή

Γιατί να σας ενδιαφέρει αυτή η υπόθεση, που μπορεί να φαίνεται συνωμοτική;

Η έκφραση «απέκκριση εμβολίου» δηλώνει συμβατικά την πιθανή απέκκριση ενός ιού από ένα άτομο που έχει πρόσφατα εμβολιαστεί κατά αυτού του ιού. αυτό ισχύει μόνο για εμβόλια ζωντανού εξασθενημένου ιού (MMR, ανεμευλογιάς, ροταϊού, ρινικού εκνεφώματος γρίπης).

Κανένα εμβόλιο για τον COVID-19 δεν χρησιμοποιεί αυτόν τον τύπο. Επομένως, δεν υπάρχει κίνδυνος ένα εμβολιασμένο άτομο να μεταδώσει έναν ιό του εμβολίου. Ωστόσο, τα εμβόλια COVID-19 που βασίζονται σε mRNA είναι τα πρώτα που χρησιμοποιούνται εμπορικά σε ανθρώπους παγκοσμίως και δεν έχουν διεξαχθεί μελέτες σχετικά με την πιθανή απέκκριση του ίδιου του εμβολίου (νανοσωματίδια λιπιδίων που περιέχουν mRNA) του mRNA του εμβολίου ή του προϊόντος του εμβολίου. η πρωτεΐνη ακίδας που μεταφράζεται από τα κύτταρα του εμβολιαζόμενου.

Ο εμβολιασμός κατά του Covid ξεκίνησε τον Δεκέμβριο του 2020. Η πρώτη δημοσιευμένη μαρτυρία απέκκρισης εμβολίου που έχω δει είναι από τον Δεκέμβριο του 2021, αυτή του Dr Ray Sahelian1 :

Ανέφερε περιπτώσεις ιατρών ή επιστημονικών συναδέλφων που παρατήρησαν συμπτώματα παρόμοια με εκείνα των ανεπιθύμητων ενεργειών του εμβολίου αφού είχαν έρθει σε επαφή με πρόσφατα εμβολιασμένα άτομα. πρότεινε την απέκκριση των προϊόντων εμβολίου μέσω του δέρματος και της αναπνευστικής οδού και ζήτησε πρόσθετες μελέτες.

Στην αρχή, αυτού του είδους η μαρτυρία δεν μου φαινόταν πολύ αξιόπιστη, αλλά συσσωρεύτηκαν και τον Οκτώβριο του 2021 έλαβα μια μαρτυρία από μια ομάδα Γάλλων φροντιστών: παρατήρησαν εγκεφαλικό σε ένα 7χρονο παιδί χωρίς παράγοντα κινδύνου και του οποίου οι γονείς είχαν πρόσφατα εμβολιαστεί. Υπάρχουν ομάδες Telegram που παραθέτουν μαρτυρίες από ασθενείς και γιατρούς. Όλες αυτές οι μαρτυρίες σχετίζονται με συμπτώματα ή καταστάσεις που αναφέρονται στις βάσεις δεδομένων των ανεπιθύμητων ενεργειών των εμβολίων COVID-19: οι δυσμενείς επιπτώσεις των εμβολίων mRNA κατά του COVID-19 αναγνωρίζονται πλέον από ρυθμιστικούς φορείς (βλ. βάσεις δεδομένων VAERS και δεδομένα Eudravigilance, καθώς και ANSM, Γαλλία).

Όλα τα εμβόλια βασίζονται στην πρωτεΐνη ακίδας, η οποία έκτοτε έχει αναγνωριστεί ως ο κύριος ένοχος για την παθογένεια του SARS-CoV-22 ,3 ,4 ,5 ,6 . Επομένως, σε περίπτωση που το εμβόλιο ή το προϊόν του (η ακίδα) μετατραπεί από εμβολιασμένο σε μη εμβολιασμένο, οι ανεπιθύμητες ενέργειες του εμβολίου θα πρέπει να εντοπιστούν σε ορισμένα μη εμβολιασμένα άτομα που έρχονται σε επαφή με εμβολιασμένα άτομα. Η διερεύνηση παθολογιών που σχετίζονται με το εμβόλιο σε μη εμβολιασμένες ηλικιακές ομάδες σε επαφή με εμβολιασμένα άτομα θα μπορούσε να δώσει ενδείξεις προς την κατεύθυνση της απέκκρισης του εμβολίου αλλά δεν δίνει σημαντικά αποτελέσματα (αδημοσίευτο). Καθώς υπάρχουνπερισσότερες από 400 παθολογίες που συνδέονται με τις ανεπιθύμητες ενέργειες του εμβολίουστις βάσεις δεδομένων αναφοράς φαρμακοεπαγρύπνησης (βλ. για παράδειγμα δεδομένα ΗΒ, δεδομένα αυθόρμητης αναφοράς για το εμβόλιο Pfizer τον Μάιο του 20217 ),αυτός ο μεγάλος αριθμός αραιώνει τα σήματα που μπορεί να εμφανιστούν σε μη εμβολιασμένες ηλικιακές ομάδες.

Από την άλλη πλευρά, η ανάλυση ευρωπαϊκών, ισραηλινών και αμερικανικών δεδομένων δείχνει ότι, για την μη εμβολιασμένη ηλικιακή ομάδα 0-14 ετών, οι περισσότερες συσχετίσεις μεταξύ θνησιμότητας και εμβολιασμού στους ενήλικες είναι θετικές: υπερβολική θνησιμότητα σε μη εμβολιασμένες ηλικιακές ομάδες στην αρχή του Οι εκστρατείες εμβολιασμού θα μπορούσαν να εξηγηθούν από ένα φαινόμενο μετάδοσης του εμβολίου ή των προϊόντων του. Αυτό το μοτίβο θετικών συσχετισμών αυξάνεται από την εβδομάδα του εμβολιασμού στην εβδομάδα 18 μετά τον εμβολιασμό και στη συνέχεια εξαφανίζεται. Υποδεικνύει έμμεσες αρνητικές επιπτώσεις του εμβολιασμού ενηλίκων στη θνησιμότητα παιδιών ηλικίας 0-14 ετών τις πρώτες 18 εβδομάδες μετά τον εμβολιασμό8 .

Ποια είναι η βιολογική αληθοφάνεια μετάδοσης του εμβολίου ή των προϊόντων του από τον εμβολιασμένο στον μη εμβολιασμένο;

Για να απαντήσει κανείς σε αυτό το ερώτημα, πρέπει να διερευνήσει τη δυνατότητα και τις οδούς απέκκρισης του εμβολίου ή των προϊόντων του και τις οδούς πιθανής διείσδυσής τους.

Όσον αφορά το εμβόλιο και τα προϊόντα του, αυτά μπορεί να είναι η μετάδοση κυκλοφορούσας ακίδας στον εμβολιαζόμενο (σε ελεύθερη μορφή ή ενσωματωμένη σε εξωσώματα ή εξωκυττάρια κυστίδια – EVs), κυκλοφορούσα γυμνή μετάδοση mRNA ή ενθυλακωμένη σε πλήρη λιπιδικά νανοσωματίδια (LNPs).

Είναι επομένως απαραίτητο να μελετηθεί η ικανότητα των LNPs, του mRNA και της ακίδας του εμβολίου να απεκκρίνονται με διαφορετικές πιθανές οδούς και στη συνέχεια η ικανότητα των ίδιων προϊόντων να διεισδύουν από διαφορετικές οδούς στο σώμα μη εμβολιασμένων σε στενή επαφή με εμβολιασμένα άτομα.

Η απέκκριση των LNP που περιέχουν mRNA, η απέκκριση του τροποποιημένου mRNA που κωδικοποιεί την ακίδα και η απέκκριση της ακίδας που παράγεται από τους εμβολιαζόμενους δεν έχουν μελετηθεί στη δοκιμαστική φάση των εμβολίων, αντίθετα με τις συστάσεις των ρυθμιστών σχετικά με τις γονιδιακές θεραπείες. Οι φαρμακοκινητικές μελέτες των νανοσωματιδίων γενικά δεν έχουν διερευνήσει την απέκκριση μεταφορέων ή μεταφερόμενων μορίων. Αυτή η περιοχή πρέπει να διερευνηθεί. Έγγραφα Pfizer που ελήφθησαν από το FOIAΤο Σχήμα 9 δείχνει ότι μόνο η απέκκριση ορισμένων συστατικών LNP (ALC-0315 και ALC-0159) μελετήθηκε στα ούρα και τα κόπρανα αρουραίων στους οποίους έγινε ένεση μέσω της ενδοφλέβιας οδού.

Ρύθμιση της απόρριψης γονιδιακών θεραπειών από ρυθμιστικούς φορείς

Πριν από τα εμβόλια mRNA, δεν υπήρχε ρύθμιση των κλινικών δοκιμών mRNA, ενώ τα προϊόντα γονιδιακής θεραπείας ελέγχονται αυστηρά. Είναι δύσκολο να δικαιολογηθεί ότι τα εμβόλια mRNA δεν θεωρούνται με τον ίδιο τρόπο όπως οι γονιδιακές θεραπείες σε σχέση με αυτόν τον κανονισμό,πράγματι η μόνη διαφορά είναι ότι υποτίθεται ότι προστατεύουν από μια ασθένεια και όχι για να τη θεραπεύουν. Οι γονιδιακές θεραπείες προορίζονται για μικρό αριθμό ατόμων με κακή υγεία, ενώ τα εμβόλια χρησιμοποιούνται σε μεγάλη κλίμακα σε υγιή άτομα: επομένως θα ήταν συνετό να εφαρμόζονται αυστηρότεροι κανόνες γι' αυτούς. Ωστόσο, η περιγραφή των προϊόντων γονιδιακής θεραπείας που παρέχονται από ρυθμιστικούς φορείς περιλαμβάνει εμβόλια mRNA και αδενοϊού.

Το έγγραφο του FDA του 2015 σχετικά με τις μελέτες απέκκρισης γονιδιακών προϊόντων10 αφορά τις γονιδιακές θεραπείες που ορίζονται ως «όλα τα προϊόντα που ασκούν τα αποτελέσματά τους με μεταγραφή ή/και μετάφραση μεταφερόμενου γενετικού υλικού ή/και με ενσωμάτωση στο γονιδίωμα του ξενιστή και τα οποία χορηγούνται με τη μορφή νουκλεϊκών οξέων, γενετικά τροποποιημένων ιών ή μικροοργανισμών», με αυτή την έννοια τα εμβόλια mRNA είναι όντως προϊόντα γονιδιακής θεραπείας και θα έπρεπε να έχουν υποβληθεί σε αυτές τις μελέτες απέκκρισης.

Θα πρέπει να διεξάγονται μελέτες απέκκρισης για κάθε VBGT (προϊόντα γονιδιακής θεραπείας που βασίζονται σε ιούς ή βακτήρια) πρώτα σε ζώα αλλά και σε ανθρώπους, ειδικά όταν υπάρχει κίνδυνος μετάδοσης σε ανθρώπους χωρίς θεραπεία. Σύμφωνα με αυτό το έγγραφο, οι κλινικές μελέτες απέκκρισης δεν είναι αυτόνομες μελέτες αλλά ενσωματώνονται στο σχεδιασμό μιας δοκιμής ασφάλειας ή αποτελεσματικότητας. Ο όρος "έκκριση" αναφέρεται στην απελευθέρωση προϊόντων VBGT από τον ασθενή με οποιαδήποτε ή όλες από τις ακόλουθες οδούς: κόπρανα (κόπρανα). εκκρίσεις (ούρα, σάλιο, ρινοφαρυγγικά υγρά κ.λπ.), ή μέσω του δέρματος (φλύκταινες, βλάβες, πληγές).

κατευθυντήριες γραμμές του NIH11 παρέχει αρχές βιοασφάλειας ειδικά για « μόρια συνθετικών νουκλεϊκών οξέων, συμπεριλαμβανομένων εκείνων που είναι χημικά ή αλλιώς τροποποιημένα αλλά μπορούν να συνδυαστούν με μόρια νουκλεϊκού οξέος που απαντώνται στη φύση ». Πρόκειται για μόρια περισσότερων από 100 νουκλεοτιδίων με δυνατότητα μεταγραφής ή μετάφρασης. Αυτή η εργασία Απριλίου 2019 καλύπτει τροποποιημένα και μη τροποποιημένα συνθετικά νουκλεϊκά οξέα. Κάθε πείραμα που περιλαμβάνει τη σκόπιμη μεταφορά νουκλεϊκού οξέος σε έναν άνθρωπο πρέπει να προηγείται από την έγκριση της θεσμικής επιτροπής βιοασφάλειας(η οποία επιβεβαιώνεται εδώ12 ), αλλά δεν δόθηκε έγκριση λόγω έκτακτης εκκαθάρισης για εμβόλια mRNA.

Βασισμένο σε έγγραφο του EMA για την απέκκριση γονιδιακών προϊόντων13 εμβόλια mRNA πληρούν τον ορισμό των PGMTs (φάρμακα γονιδιακής θεραπείας), αλλά ο χαρακτηρισμός τους ως "εμβόλιο" τους επέτρεψε να ξεφύγουν από τις απαιτήσεις κλινικών δοκιμών για γονιδιακά προϊόντα που σχετίζονται ιδίως με τη δυνατότητα απέκκρισης, βιοκατανομής, φαρμακοδυναμικής, γονοτοξικότητας. μεταλλαξογένεση με παρεμβολή (σελίδα 36: Φαρμακοκινητικές μελέτες θα πρέπει να πραγματοποιούνται όταν μια πρωτεΐνη απεκκρίνεται στην κυκλοφορία του αίματος). Πρέπει επίσης να μελετηθεί η έκφραση της αλληλουχίας νουκλεϊκού οξέος (η μετάφρασή της σε πρωτεΐνη) (σελίδα 37). Η απέκκριση ορίζεται ως η διάδοση του φορέα μέσω εκκρίσεων και/ή κοπράνων και θα πρέπει να αντιμετωπίζεται σε ζωικά μοντέλα (σελίδα 30).

Έτσι, σύμφωνα με τους κανονισμούς των αμερικανικών και ευρωπαϊκών πρακτορείων, τα εμβόλια mRNA αντιστοιχούν στον ορισμό των προϊόντων γονιδιακής θεραπείας και θα έπρεπε να έχουν αποτελέσει αντικείμενο μελετών απέκκρισης από όλα τα εκκρινόμενα υγρά (ούρα, σάλιο, πτύελα, ρινοφαρυγγικά υγρά, σπέρμα, μητρικό γάλα ), κόπρανα και δέρμα (υγιές ή κατεστραμμένο). Αυτές οι μελέτες θα έπρεπε να αφορούσαν τα νανοσωματίδια που περιέχουν το mRNA, το γυμνό mRNA και το προϊόν του εμβολίου μετά τη μετάφραση (την πρωτεΐνη ακίδας).

Ένα παράδειγμα μελέτης απέκκρισης που αντιστοιχεί σε αυτόν τον κανονισμό γονιδιακών προϊόντων βρίσκεται σε μια αναφορά που υποβλήθηκε στον EMA για την έγκριση ενός φαρμάκου που προορίζεται για τη θεραπεία μιας ορφανής νόσου. είναι ένα προϊόν που βασίζεται σε LNP ​​των οποίων η σύνθεση είναι παρόμοια με αυτή των εμβολίων mRNA. Εδώ, τα LNP περιέχουν siRNA. Οι κανονισμοί απαιτούν εις βάθος μελέτες για αυτήν τη γονιδιακή θεραπεία,σε αντίθεση με εκείνα των εμβολίων mRNA που είναι παρόμοια. Ωστόσο, οι μελέτες για την απέκκριση αυτών των LNP παρέχουν λίγες πληροφορίες. Στα ζώα, η ραδιενέργεια των LNP ανευρίσκεται στα ούρα (50%) και στα κόπρανα (μεταξύ 10% και 24%). Σε ανθρώπους, δεν έχει διεξαχθεί μελέτη με ραδιενεργά LNP, αλλά τα συστατικά των LNPs βρίσκονται στα ούρα για λιγότερο από το 1% των συγκεντρώσεων στο πλάσμα. Υποτίθεται ότι η αποβολή γίνεται μέσω των κοπράνων αλλά αυτό δεν έχει αποδειχθεί. Δεν έχουν γίνει μελέτες σχετικά με την απέκκριση στο γάλα ή άλλα σωματικά υγρά14 .

Αναφορά σε πιθανή απόρριψη εμβολίου στα έγγραφα της Pfizer

Το πρωτόκολλο της δοκιμής φάσης I/II/III της Pfizer για τα εμβόλια mRNA COVID-19 (που ξεκίνησε τον Μάιο του 2020) αναφέρει τη δυνατότητα διέλευσης του προϊόντος που μελετήθηκε με εισπνοή ή επαφή με το δέρμα και διέλευση μέσω σπέρματος άνδρα που εκτέθηκε μέσω εισπνοής ή δέρματος επαφή και διέλευση από το μητρικό γάλα. Αναφέρεται επίσης η πιθανότητα ανεπιθύμητης αντίδρασης στο εμβόλιο μετά από αυτές τις εκθέσεις15 .

Τα δεδομένα της Pfizer δείχνουν ξεκάθαρα ότι μια έγκυος γυναίκα μπορεί να εκτεθεί στην « παρέμβαση της μελέτης λόγω της περιβαλλοντικής έκθεσης  ». Η έκθεση στο περιβάλλον μπορεί να συμβεί μέσω «  εισπνοής ή επαφής με το δέρμα  ». Μερικά παραδείγματα περιβαλλοντικής έκθεσης κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης περιλαμβάνουν:
– Μια γυναίκα μέλος της οικογένειας ή πάροχος υγειονομικής περίθαλψης αναφέρει ότι είναι έγκυος αφού εκτεθεί στην παρέμβαση της μελέτης μέσω εισπνοής ή επαφής με το δέρμα.
– Ένα αρσενικό μέλος της οικογένειας ή πάροχος υγειονομικής περίθαλψης που εκτέθηκε στην παρέμβαση της μελέτης μέσω εισπνοής ή επαφής με το δέρμα εκθέτει στη συνέχεια τη γυναίκα τουπριν ή γύρω από την περίοδο της σύλληψης.

Αυτό σημαίνει ξεκάθαρα ότι οποιαδήποτε επαφή, συμπεριλαμβανομένης της σεξουαλικής επαφής με κάποιον που έχει λάβει τα εμβόλια, εκθέτει όσους δεν έχουν λάβει τα εμβόλια στην «παρέμβαση», δηλαδή στο mRNA. Η έκθεση στον θηλασμό έπρεπε επίσης να ειδοποιηθεί αμέσως κατά τη διάρκεια της δοκιμής: υποτίθεται ότι ο ερευνητής ανησυχεί ότι μια θηλάζουσα μητέρα θα μπορούσε να μεταδώσει το πειραματικό mRNA στο μωρό της εάν λάβει το εμβόλιο απευθείας ή εάν «εκτεθεί στην παρέμβαση της μελέτης με εισπνοή ή επαφή με το δέρμα.

Δομή και λειτουργία εξωκυτταρικών κυστιδίων (EVs) ή εξωσωμάτων και λιπιδικών νανοσωματιδίων (LNPs)

Τα φυσικά εξωκυτταρικά κυστίδια (EVs ή εξωσώματα) δημιουργούνται από τα περισσότερα ζωντανά κύτταρα, είναι σφαιρικά διπλοστοιβάδα πρωτελιπίδια που κυμαίνονται σε μέγεθος από 20 έως 4000 nm και μπορούν να περιέχουν διάφορα μόρια (λιπίδια, πρωτεΐνες και νουκλεϊκά οξέα, όπως σήμα RNAs). Τα EV είναι φυσικοί φορείς στο ανθρώπινο σώμα και εμπλέκονται σε διακυτταρικές επικοινωνίες, μπορούν να χρησιμεύσουν ως φορέας για διαφορετικά μόρια που μπορούν έτσι να περάσουν από κύτταρο σε κύτταρο, με αποτέλεσμα μια αξιοσημείωτη απόκριση από το κύτταρο στόχο16 . Τα συνθετικά LNP στα εμβόλια mRNA έχουν την ίδια δομή με τα φυσικά εξωσώματα που επιδιώκουν να μιμηθούν17 ,18 . Τα φυσικά παραγόμενα εξωσώματα μπορούν να φέρουν εμβόλιο ή ακίδα mRNA, όπως συζητείται παρακάτω. Τα LNP έχουν την ικανότητα (όπως τα φυσικά εξωσώματα) να συντήκονται με τις κυτταρικές μεμβράνες και να απελευθερώνουν το φορτίο τους στο κυτταρόπλασμα.

Τα LNP που χρησιμοποιούνται για τα εμβόλια mRNA είναι νανομετρικού μεγέθους (λιγότερο από 1 μικρόμετρο) συστήματα λιπιδίων που αποτελούνται από 2 ή περισσότερα (συνήθως 4) λιπίδια σε ποικίλες αναλογίες. Η πιο τυπική λιπιδική σύνθεση που χρησιμοποιείται για συστήματα mRNA-LNP αποτελείται από ένα κατιονικό/ιονιζόμενο λιπίδιο, ένα φωσφολιπιδικό "βοηθητικό λιπίδιο", χοληστερόλη και/ή ένα λιπίδιο που σχετίζεται με πολυ(αιθυλενογλυκόλη) (PEG). Τα LNPs μπορούν να χορηγηθούν IM, υποδόρια, ενδοδερμικά, ενδοτραχειακά, από το στόμα, οφθαλμικά και ακόμη και τοπικά. Τα LNP που εγχέονται από όλες αυτές τις οδούς είναι ικανά να οδηγήσουν στη μετάφραση του mRNA σε πρωτεΐνη για αρκετές ημέρες19 . Το μέγεθος των LNP στα εμβόλια mRNA του COVID-19 θα είναι μεταξύ 60 και 100 nm20 .

Η φυσική διακίνηση EV είναι αμφίδρομη κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης (τα EVs διασχίζουν τον φραγμό μητέρας-εμβρυϊκού και τα κύτταρα της μήτρας εκκρίνουν συνεχώς εξωσώματα) και τα EVs μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη χορήγηση φαρμάκων στο έμβρυο κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης21 . Τα EVs έχουν πιθανό πλεονέκτημα για χρήση σε θεραπείες εμβολίων, επειδή είναι οι φυσικοί φορείς αντιγόνων του σώματος και μπορούν να κυκλοφορούν στα σωματικά υγρά για να μεταφέρουν αντιγόνα ακόμη και στα απομακρυσμένα όργανα[16].

Λίγα είναι γνωστά για τη φαρμακοκινητική των εμβολίων mRNA

Νανοσωματίδια σε ζώα

Σύμφωνα με μια μελέτη ερευνητών ανεξάρτητων από κατασκευαστές εμβολίων mRNA, σε ποντίκια, τα LNP που φέρουν mRNA που εγχύονται ΙΜ περνούν από το σημείο της ένεσης στους λεμφαδένες και στη συνέχεια στη γενική κυκλοφορία, συσσωρεύοντας κυρίως στο ήπαρ και τη σπλήνα. Τα LNP πρώτα περνούν στη λεμφική κυκλοφορία και μετά στην κυκλοφορία του αίματος (LNP μικρότερα από 200 nm περνούν απευθείας στη λέμφο ενώ αυτά των 200 έως 500 nm μεταφέρονται στη λέμφο από τα δενδριτικά κύτταρα). Η ακούσια άμεση ένεση σε ένα αιμοφόρο αγγείο μπορεί επίσης να συμβεί με την ενδοφλέβια ένεση22 .

Νανοσωματίδια στον άνθρωπο

Η έκθεση του ανθρώπινου σώματος σε νανοσωματίδια μπορεί να συμβεί κατά λάθος μέσω εισπνοής, επαφής με το δέρμα ή κατάποσης. Σε περίπτωση εισπνοής, οι πιθανές οδοί μεταφοράς των νανοσωματιδίων είναι η κυκλοφορία του αίματος (συστημική), τα λεμφικά αγγεία, ο γαστρεντερικός σωλήνας και το κεντρικό ή/και περιφερικό νευρικό σύστημα23 .

Η απέκκριση των επικαλυμμένων με PEG LNP γίνεται κυρίως μέσω των κοπράνων και των ούρων και κυρίως μέσω των κοπράνων όταν έχουν διάμετρο > 80 nm. Τα LNPs μπορούν να απεκκριθούν μέσω του σάλιου, του ιδρώτα και του μητρικού γάλακτος24 .

Τα LNP μεγέθους <5 nm απεκκρίνονται ταχέως από τους νεφρούς. Τα νανοσωματίδια μεγέθους μεταξύ 5 και 200 ​​nm τείνουν να έχουν εκτεταμένη κυκλοφορία αίματος. Τα μεγαλύτερα LNP έχουν παρατεταμένη κυκλοφορία του αίματος και χαμηλή νεφρική απέκκριση. Λόγω του μεγέθους των LNP, η εισπνοή είναι η πιο άμεση οδός εισόδου στο πνευμονικό σύστημα. Η έκθεση μπορεί να είναι σκόπιμη, όπως στην περίπτωση στόχευσης ή θεραπευτικών νανοσωματιδίων, ή ακούσια, μέσω εισπνοής ή δερματικής έκθεσης, λόγω του αυξανόμενου αριθμού βιομηχανικών εφαρμογών νανοσωματιδίων25 .

mRNA

Επιμονή του mRNA του ιού μετά από ιογενή μόλυνση

Το ιικό RNA ορισμένων ιών παραμένει για μεγάλο χρονικό διάστημα στον εγκέφαλο, τα μάτια, τους όρχεις: αυτό έχει αποδειχθεί για τον ιό της ιλαράς, τον ιό Έμπολα, τον Ζίκα και το Μάρμπουργκ. Ο SARS-CoV-2 επιμένει στην αναπνευστική οδό και στο έντερο. Τα ιικά RNA ανιχνεύονται επίσης σε εκκρίσεις, αίμα ή ιστούς. Η παρατεταμένη απέκκριση αυτών των RNA στην αναπνευστική οδό, τα κόπρανα, τον ιδρώτα, το υγρό του επιπεφυκότα και τα ούρα είναι συχνή. Μελέτες έχουν δείξει ότι το πλήρες ιικό RNA μπορεί να παραμείνει μακροπρόθεσμα. Αυτό το επίμονο RNA μπορεί να μεταφραστεί σε πρωτεΐνες ακόμα κι αν δεν μπορεί να συγκροτηθεί βιώσιμος ιός. Σε ασθενείς που αργότερα αναπτύσσουν μακρά COVID-19, το ιικό RNA βρίσκεται στο αίμα στην οξεία φάση της νόσου26 .

Η μοίρα του mRNA του εμβολίου

Τεράστιες ποσότητες mRNA εγχέονται σε σύγκριση με την κυκλοφορία ενός ιού κατά τη διάρκεια μιας φυσικής μόλυνσης: έως και 10 έως 7 φορές περισσότερες, σύμφωνα με τον καθηγητή Jean-Michel Claverie.27 .

Το mRNA του εμβολίου υπάρχει από την πρώτη ημέρα και παραμένει στην κυκλοφορία του αίματος για τουλάχιστον 2 εβδομάδες μετά την ένεση. Η συγκέντρωσή του αρχίζει να μειώνεται μετά από 4 ημέρες. Αυτή η διάρκεια ζωής είναι πολύ μεγαλύτερη από ό,τι ισχυρίστηκαν οι κατασκευαστές με βάση σύντομες μελέτες σε αρουραίους. Το μεταφερόμενο mRNA είναι ενθυλακωμένο σε LNPs αλλά βρίσκεται στο πλάσμα (δηλαδή δεν σχετίζεται με λευκά αιμοσφαίρια). Αυτό το mRNA μπορεί να μεταφραστεί σε πρωτεΐνη ακίδας σε ευαίσθητα κύτταρα και ιστούς28. Το mRNA που συσκευάζεται στα LNPs είναι σε θέση να διαφύγει από αυτά και να σχηματίσει εξωκυτταρικά κυστίδια που το μεταφέρουν σε άλλα κύτταρα: αυτά τα κυστίδια εκκρίνονται μετά την ενδοκυττάρωση των LNP που είναι φορτωμένα με mRNA. Αυτά τα VE προστατεύουν το mRNA κατά τη μεταφορά και το διανέμουν ανέπαφο στα κύτταρα αποδέκτες, το mRNA είναι λειτουργικό και μπορεί στη συνέχεια να μεταφραστεί στην πρωτεΐνη ενδιαφέροντος. Η φλεγμονώδης απόκριση είναι ασθενέστερη μετά τη διαμόλυνση με EVs παρά με LNPs. Οι οδοί πρόσληψης των VEs διαφέρουν από αυτές των LNPs και είναι απίθανο να ενεργοποιήσουν την αυτοφαγική-λυσοσωμική οδό, καθώς απελευθερώνουν το περιεχόμενό τους στο κυτταρόπλασμα χωρίς πιθανώς να υποστούν λυσοσωμική παγίδευση. Επίσης, λόγω του μικρού τους μεγέθους,29 .

Η παρουσία EVs σε όλα τα βιορευστά πιστοποιείται. Μπορεί να περιέχουν νουκλεϊκά οξέα. Στον ιδρώτα, βρίσκουμε EVs που περιέχουν νουκλεϊκά οξέα από βακτήρια, ιούς, μύκητες του δέρματος αλλά και από ανθρώπινα κύτταρα. Αυτά τα EV μπορεί επίσης να περιέχουν ιούς (για παράδειγμα ηπατίτιδα C). Μικρά mRNA (20 έως 200 bp) βρίσκονται σε αυτά τα VEs ιδρώτα, είναι λειτουργικά (μπορούν να μεταφραστούν), τα RNA προστατεύονται από τις νουκλεάσες του δέρματος στα VEs30 .
Σημειώστε ότι το RNA του εμβολίου αποτελείται από 4284 νουκλεοτίδια (Pfizer)31 . Επομένως, είναι σκόπιμο να μελετηθεί η πιθανότητα τα RNA αυτού του μεγέθους να απεκκρίνονται μέσω του ιδρώτα.

Τα EV μπορούν να περιέχουν μόρια «σήματος», όπως τα miRNA. Είναι πιθανό τα EV να περιέχουν πλήρη mRNA. αυτοί είναι βασικοί μεσολαβητές της ενδοκυτταρικής επικοινωνίας. Οι αναλύσεις RNA του αίματος και του ιδρώτα συσχετίζονται: EVs που βρίσκονται στον ιδρώτα αντικατοπτρίζουν την κυκλοφορία των EVs στο πλάσμα. Τα γυμνά RNA βρίσκονται επίσης στον ιδρώτα (δεν ενθυλακώνονται σε EV). Τα miRNA επιλέγονται επιλεκτικά και εμπλουτίζονται σε EVs ιδρώτα από αίμα και δεν κυκλοφορούν παθητικά στο αίμα ή στα κλάσματα του ιδρώτα32 .

Αύξηση της εφίδρωσης μετά το εμβόλιο Covid έχει σημειωθεί33 και άτομα που έλαβαν το εμβόλιο παραπονέθηκαν για αυξημένη εφίδρωση, ειδικά τη νύχτα34 .

Η πιθανότητα εξίδρωσης EVs από το δέρμα έχει αποδειχθεί: τα κερατινοκύτταρα είναι ικανά να εκκρίνουν EVs ικανά να μεταφέρουν miRNA. Στην ψωρίαση, τα EV που εκκρίνονται από τα κερατινοκύτταρα περνούν από κύτταρο σε κύτταρο: από κερατινοκύτταρο σε γειτονικό κερατινοκύτταρο. Σε ασθενείς με ομαλό λειχήνα (φλεγμονώδες εξάνθημα), τα EV που φέρουν miRNAs απεκκρίνονται στο σάλιο35 .

Τα νανοσωματίδια υπάρχουν φυσικά στα πτύελα36 : έχουν απομονωθεί εξωσώματα που περιέχουν RNA από τα πτύελα ασθενών με ήπιο άσθμα37 .

Διέλευση του mRNA του εμβολίου στο γάλα

Το mRNA του εμβολίου βρίσκεται στο γάλα του 1/10 των γυναικών που μελετήθηκαν (4/40) την πρώτη εβδομάδα μετά τον εμβολιασμό με το εμβόλιο mRNA (είτε μετά τη δόση 1 είτε μετά τη δόση 2).

Οι ποσότητες μπορούν να φτάσουν τα 2ng/ml γάλακτος38 . Αυτή η ποσότητα μπορεί να φαίνεται μικρή σε σύγκριση με τα 30 μικρογραμμάρια mRNA που εγχύθηκαν με το εμβόλιο, αλλά μπορεί να είναι αρκετή για να παραχθεί μια σημαντική ποσότητα αιχμής. Πράγματι, ένα βρέφος προχωρά σε πολλές τροφές την ημέρα, για περίπου 240 έως 360 ml την ημέρα και συνολικά για μια εβδομάδα 1680 έως 2520 ml την πρώτη εβδομάδα. Το νεογέννητο, που ζυγίζει μεταξύ 2 και 5 kg, θα μπορούσε επομένως να εκτεθεί σε δόση 5 μg mRNA την πρώτη του εβδομάδα. Αυτό φαίνεται δυσανάλογο σε σύγκριση με τα 10 μg που χορηγούνται με ένεση σε παιδιά ηλικίας 5 έως 11 ετών που ζυγίζουν περίπου 18 έως 35 kg αντίστοιχα.39 .

Η μέθοδος που χρησιμοποιήθηκε στην τελευταία μελέτη είναι πιο ευαίσθητη από αυτή των Golan et al. που δεν βρήκε mRNA στο γάλα40 . Αυτή η ίδια ομάδα είχε επίσης εξερευνήσει τη διέλευση του mRNA του εμβολίου στο γάλα αναζητώντας έμμεσα το PEG που περιέχεται στα LNPs. Η PEG αναζητήθηκε στο γάλα 13 γυναικών σε διαφορετικές χρονικές στιγμές μετά τον εμβολιασμό: Η Εικόνα 1 του άρθρου δείχνει την ανίχνευση της PEG από το εμβόλιο στο γάλα μεταξύ 24 ωρών και μίας εβδομάδας μετά την ένεση. Ωστόσο, οι συγγραφείς κατέληξαν χωρίς να διευκρινίσουν ότι αυτές οι ποσότητες δεν ήταν σημαντικές.41 .

Μια άλλη μελέτη διερεύνησε εάν το mRNA του εμβολίου COVID-19 θα μπορούσε να ανιχνευθεί στο εκχυμένο μητρικό γάλα ατόμων που θηλάζουν που έλαβαν τον εμβολιασμό εντός 6 μηνών από τον τοκετό. Η παρουσία του mRNA μελετήθηκε σε ελεύθερη μορφή και ενθυλακώθηκε σε EVs. Τα EVs απομονώθηκαν με φυγοκέντρηση του γάλακτος. Το RNA του εμβολίου βρέθηκε εντός 48 ωρών από τον εμβολιασμό και σε υψηλότερες συγκεντρώσεις στα EVs από ότι στο πλήρες γάλα. Η υψηλότερη συγκέντρωση που βρέθηκε ήταν 17 pg/ml στα EV και η χαμηλότερη ήταν 1,3 pg/ml στο πλήρες γάλα. Η παρουσία προτεραιότητας του mRNA στα EV και όχι στο πλήρες γάλα μπορεί να εξηγήσει γιατί οι Golan et al. δεν το βρήκε42 .

Είναι γνωστό εδώ και μερικά χρόνια ότι το mRNA που ενθυλακώνεται στα EV προστατεύεται από τα γαστρικά υγρά και μπορεί να επιμολύνει εντερικά κύτταρα.43 ,44 . Μια πρόσφατη μελέτη από τους Melnik και Schmitz επιβεβαιώνει ότιτα ηλεκτρικά ηλεκτρικά γάλατα επιβιώνουν στις ακραίες συνθήκες του γαστρεντερικού σωλήνα, εσωτερικεύονται από την ενδοκυττάρωση, είναι βιοδιαθέσιμα και μπορούν να επιμολύνουν εντερικά κύτταρα45 .

Διαπλακουντιακή διέλευση νανοσωματιδίων;

Σε ποντίκια, τα LNP του ίδιου τύπου με αυτά που χρησιμοποιούνται στα εμβόλια mRNA του COVID-19 έχουν δείξει την ικανότητά τους να διαμολύνουν mRNA μετά από ένεση σε εμβρυϊκή φλέβα ή στη μήτρα46 .
Σε μια δοκιμή ανοσοποίησης εμβρύων κατά του νεογνού έρπητα σε έγκυα ποντίκια με έγχυση LNP φορτωμένων με mRNA στη μητέρα, δεν συζητείται η πιθανότητα ότι η διαπλακουντιακή δίοδος των LNPs θα εξηγούσε την ανοσοποίηση του εμβρύου παρά η διέλευση της επαγόμενης Ig σε η μητέρα47 . Μελέτες έχουν δείξει ότι είναι πολύ πιθανό τα νανοσωματίδια μεγέθους συγκρίσιμου με αυτά που χρησιμοποιούνται για τα εμβόλια mRNA να μπορούν να περάσουν διαπλακουντιακά στον άνθρωπο.48 ,49 .

Η χορήγηση θεραπειών που βασίζονται στο LNP κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης παρουσιάζει κινδύνους που πρέπει να μελετηθούν.Η ανίχνευση της διαπλακουντιακής διόδου εξαρτάται από την ευαισθησία των μεθόδων ανίχνευσης: για ορισμένους τύπους νανοσωματιδίων, έχει παρατηρηθεί εμβρυοτοξικότητα ενώ δεν έχει παρατηρηθεί απορρόφηση από το έμβρυο. αυτή η απορρόφηση δεν φαίνεται να συσχετίζεται με τον τύπο, το μέγεθος ή το επιφανειακό ηλεκτρικό φορτίο των νανοσωματιδίων. Η μετατόπιση του LNP είναι πιθανό να εξαρτάται από τα διαφορετικά στάδια της εγκυμοσύνης. Κατά το πρώτο τρίμηνο, ο φραγμός του πλακούντα είναι πολύ παχύς για να προστατεύει το αναπτυσσόμενο έμβρυο και γίνεται λεπτός στο τέλος, όταν απαιτούνται μεγάλες ποσότητες θρεπτικών συστατικών για την υποστήριξη της εμβρυϊκής ανάπτυξης. Ωστόσο, στα ζώα, η μεταφορά του πλακούντα φαίνεται να είναι υψηλότερη στην αρχή της εγκυμοσύνης. Υπάρχει ανάγκη να αναπτυχθούν ανθρώπινα μοντέλα για μελέτες μεταφοράς πλακούντα στην αρχή της εγκυμοσύνης. Η σύγκριση με μελέτες σε ζώα είναι απαραίτητη, καθώς ο πλακούντας είναι το πιο ειδικό όργανο για το είδος50 ,51 . Τα LNP 240 nm είναι σε θέση να διασχίσουν τον ανθρώπινο πλακούντα φραγμό52 .

Όλες αυτές οι δημοσιεύσεις υπογραμμίζουν τη δυσκολία της παρέκτασης των μελετών σε ζώα σε ανθρώπους σχετικά με τη διαπλακουντιακή διέλευση νανοσωματιδίων. Βασισμένο σε κριτική του 202253 , τα νανοσωματίδια μπορούν να διέλθουν μέσω των συνηθισμένων μηχανισμών διακυτταρικής μεταφοράς του πλακούντα, όπως η πινοκυττάρωση, η ενεργός μεταφορά, η διευκολυνόμενη διάχυση και η παθητική διάχυση. Τα EVs φορτίου RNA είναι επίσης σε θέση να διασχίσουν τον ανθρώπινο πλακουντιακό φραγμό. Τα επικαλυμμένα με PEG LNP έχουν λιγότερη διάχυση στον πλακούντα από τα σκευάσματα που βασίζονται σε λιπόσωμα, αλλά είναι σε θέση να παραδώσουν μέρος του φορτίου τους στο έμβρυο54 .

Όλα αυτά τα δεδομένα δεν καθιστούν δυνατό να αποκλειστεί ότι τα LNP από τα εμβόλια mRNA μπορούν να φτάσουν στο έμβρυο μιας μητέρας που εμβολιάστηκε κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης.

Απέκκριση LNP στο σπέρμα;

Δεν βρήκα καμία μελέτη σχετικά με την πιθανότητα διέλευσης LNP στο σπέρμα. Ωστόσο, η επίδραση των νανοσωματιδίων στη γονιμότητα και την ποιότητα του σπέρματος έχει μελετηθεί ευρέως σε ζώα55 . Η τοξικότητα των νανοσωματιδίων στην ανδρική αναπαραγωγική λειτουργία είναι καλά τεκμηριωμένη, έχει αποδειχθεί ότι τα νανοσωματίδια χρυσού δρουν μόνο αλληλεπιδρώντας με την επιφάνεια των σπερματοζωαρίων αλλά δεν τα διαπερνούν. Δεν υπάρχουν διαθέσιμα δεδομένα σχετικά με την πιθανή διείσδυση των LNP στα σπερματοζωάρια.

Σύμφωνα με ένα εμπιστευτικό έγγραφο της Pfizer που έλαβε η FOIA56 όσον αφορά τις φαρμακοκινητικές μελέτες σε αρουραίους, τα LNP συγκεντρώνονται στις ωοθήκες και σε μικρότερο βαθμό στους όρχεις.

Η μοίρα της πρωτεΐνης ακίδας μετά τη μετάφραση mRNA

Ένας ειδησεογραφικός ιστότοπος που χρηματοδοτείται από το CDC, ο οποίος έχει πρόσβαση στις 21 Ιουλίου 2021, σημειώνει ότι η διάρκεια ζωής της πρωτεΐνης ακίδας στο αίμα είναι « άγνωστη και μπορεί να είναι μερικές εβδομάδες » .57 . Η έγχυση LNPs που περιέχουν τροποποιημένο με ψευδουριδίνη mRNA με IM, υποδόρια και ενδοδερμική οδό οδηγεί στην παραγωγή πρωτεϊνών στο σημείο της ένεσης, η διάρκεια της ενεργής μετάφρασης είναι 6 έως 10 ημέρες σε ποντίκια. Η ενδοδερμική έγχυση παράγει χαμηλότερη αρχική ποσότητα πρωτεΐνης, αλλά για μεγαλύτερο χρονικό διάστημα από την οδό ενδοφλέβιας χορήγησης. Με την ενδοδερμική οδό, ο χρόνος ημιζωής της παραγωγής πρωτεΐνης είναι ο μεγαλύτερος σε σύγκριση με τις άλλες οδούς ένεσης (IM, υποδόρια, IV, ενδοπεριτοναϊκή, ενδοτραχειακή). Με την ενδοφλέβια οδό, η πλειονότητα της μετάφρασης σταματά στο ήπαρ την 2η ημέρα μετά την ένεση, αλλά διαρκεί έως και 8 ημέρες στους μυς58 .

Στους ανθρώπους, η πρωτεΐνη ακίδας θα μπορούσε να παραμείνει για μεγάλο χρονικό διάστημα στους εμβολιαζόμενους, επομένως η επιτήρηση για ανεπιθύμητες ενέργειες του εμβολίου θα πρέπει να είναι εκτεταμένη.59 . Η σύγκριση των μέγιστων συγκεντρώσεων που επιτεύχθηκε κατά τη διάρκεια της ασθένειας και μετά τον εμβολιασμό δείχνει ότι κατά τη διάρκεια σοβαρής λοίμωξης COVID-19, η παρατηρούμενη διάμεση συγκέντρωση είναι 50 pg/ml με μέγιστες 1 ng/ml. Κατά τη διάρκεια σοβαρής λοίμωξης από Covid, μπορούν να ανιχνευθούν συγκεντρώσεις έως και 135 pg/ml ακίδας S1,πιο συχνά μεταξύ 6 και 50 pg/ml. Μετά τον εμβολιασμό με εμβόλιο mRNA, παρατηρούνται συνήθως συγκεντρώσεις έως και 150 pg/ml, αλλά μπορεί να φτάσουν τα 10 ng/ml σε άτομα με θρομβοπενία που προκαλείται από το εμβόλιο60 . Η ίδια ομάδαΤο 61 δείχνει επίσης ότι η πρωτεΐνη ακίδας παραμένει για μεγάλο χρονικό διάστημα σε ελεύθερη μορφή: η ακίδα που προκαλείται από το εμβόλιο κυκλοφορεί στο πλάσμα από την D1 μετά τον εμβολιασμό και έως και 14 ημέρες, με την κορυφή να επιτυγχάνεται στην D5 με 68 pg/mL της υπομονάδας S1 εντοπίστηκε? ολόκληρη η ακίδα ανιχνεύεται μέχρι το D15, με κορυφή στα 62 pg/mL. Μετά τη δεύτερη δόση, η ελεύθερη ακίδα δεν ανιχνεύεται πλέον επειδή θα συνδεόταν με τα αντισώματα. η μελέτη δεν ανιχνεύει ανοσοσυμπλέγματα αντισώματος-ακίδας. Μια άλλη ομάδα δείχνει επίσης ότι μετά τον εμβολιασμό με mRNA, η πρωτεΐνη ακίδας περνά στο αίμα, επιμένει για περισσότερο από μια εβδομάδα και αποβάλλεται πλήρως μέσα σε 1 μήνα. Η αύξηση της συγκέντρωσης αιχμής στο αίμα μετά τον εμβολιασμό είναι ταχεία (1 έως 3 ημέρες)62 .

Σύμφωνα με αυτοψία, η ακίδα του εμβολίου εντοπίζεται έως και τρεις εβδομάδες μετά την ένεση σε διάφορα όργανα (καρδιά, εγκέφαλος, μύες, βλαστικά κέντρα κ.λπ.) και συγκεκριμένα στο ενδοθήλιο των τριχοειδών αγγείων.63 .

Κυκλοφορούντα εξωσώματα που περιέχουν πρωτεΐνη ακίδας

Μετά τη μόλυνση με COVID-19, η ακίδα κυκλοφορεί ως εξωσώματα(ή EVs). Τα EV απελευθερώνονται από τα κύτταρα στο εξωκυτταρικό περιβάλλον υπό φυσιολογικές και παθολογικές συνθήκες. Τα EVs είναι ένα σημαντικό εργαλείο για τη διακυτταρική επικοινωνία, καθώς χρησιμεύουν ως σαΐτες για τη μεταφορά βιολογικά ενεργών πρωτεϊνών, λιπιδίων και RNA. Τα EVs μπορούν να ενσωματώσουν παθογόνες πρωτεΐνες και/ή θραύσματα ιικού RNA από μολυσμένα κύτταρα για να μεταφέρουν υλικό στα κύτταρα στόχους, γεγονός που παίζει σημαντικό ρόλο στις αποκρίσεις σε ιογενείς λοιμώξεις. Η πρωτεΐνη ακίδας SARS-CoV-2 ή θραύσματα παραγώγου ήταν σαφώς παρόντα σε EV από ασθενείς με COVID-19. Θραύσματα που προέρχονται από ακίδες υπάρχουν σε EVs όλων των ασθενών με COVID-1964 .

Το Spike κυκλοφορεί επίσης στα EV μετά τον εμβολιασμό με mRNA σε ανθρώπους. Οι συγγραφείς έχουν προτείνει ότι μετά την εσωτερίκευση του LNP και την απελευθέρωση mRNA, η ταξινόμηση αντιγόνου και η διακίνηση μπορεί να προκαλέσουν την απελευθέρωση EVs που περιέχουν πρωτεΐνη S. Τα συμβάντα που εμφανίζονται συμβαίνουν στα κορυφαία και/ή βασεοπλάγια πολωμένα κύτταρα (π.χ. επιθηλιακά)65 . Πράγματι, η ακίδα του εμβολίου περιβάλλεται αυθόρμητα σε EVs: Ο εμβολιασμός με το mRNA και η μετάφραση του mRNA προκαλεί την παραγωγή EVs που φέρουν την ακίδα και κυκλοφορούν στο αίμα έως και 4 μήνες μετά τον εμβολιασμό. Η έγχυση αυτών των VEs σε ποντίκια προκαλεί τη σύνθεση αντισωμάτων κατά της ακίδας66 .

Η ακίδα του εμβολίου βρέθηκε στα κυστίδια των δερματικών κερατινοκυττάρων ενός ασθενούς με δερματικές βλάβες 3 μήνες μετά τον εμβολιασμό με το εμβόλιο Pfizer-BioNTech. Αυτός ο ασθενής είχε λοίμωξη από τον ιό της ανεμευλογιάς ζωστήρα.

Μια εύλογη υπόθεση ήταν ότι η σταθεροποίηση RNA από την υποκατάσταση μεθυλ-ψευδουριδίνης σε όλα τα νουκλεοτίδια ουριδίνης του εμβολίου Pfizer BNT162b2 θα μπορούσε να οδηγήσει σε μακροχρόνια παραγωγή της κωδικοποιημένης ακίδας από οποιοδήποτε κύτταρο, επηρεάζοντας επίμονα το προστατευτικό μικροπεριβάλλον του ανοσοποιητικού συστήματος, συμπεριλαμβανομένου του δέρματος.67 .

Όλα αυτά τα δεδομένα υποδεικνύουν ότι τα LNP ή τα EV του εμβολίου που σχηματίστηκαν φυσικά μετά τον εμβολιασμό θα μπορούσαν να περιέχουν mRNA ή ακίδα και να υπάρχουν στα σωματικά υγρά. Είναι αυτά τα νανοσωματίδια ικανά να περάσουν από αυτά τα υγρά στο σώμα μη εμβολιασμένων ανθρώπων που έρχονται σε επαφή με πρόσφατα εμβολιασμένα άτομα;

Ικανότητα LNP ή φυσικών εξωκυτταρικών κυστιδίων (EVs ή εξωσώματα) και mRNA να εισέρχονται μέσω διαφορετικών οδών.

Χρήση νανοσωματιδίων για θεραπευτικούς σκοπούς με εισπνοή, διαδερμική οδό, in utero και μέσω της οδού του επιπεφυκότα.

Σε μια ανασκόπηση αφιερωμένη στην ασφάλεια των νανοσωματιδίων σε βιοϊατρικές εφαρμογές, μαθαίνουμε ότι η έκθεση σε LNPs μπορεί να συμβεί μέσω της κατάποσης, της ένεσης, της εισπνοής και της επαφής με το δέρμα. Ορισμένες εκθέσεις είναι ακούσιες, όπως η πνευμονική εισπνοή NPs που υπάρχουν στο περιβάλλον ή στις εγκαταστάσεις παραγωγής68 .

Τα νανοσυστήματα χρησιμοποιούνται όλο και περισσότερο για τοπική και δερματική χορήγηση, συμπεριλαμβανομένων θεραπευτικών πεπτιδίων, πρωτεϊνών, εμβολίων, θραυσμάτων γονιδίων ή σωματιδίων που φέρουν φάρμακα69 . Η ενδοδερμική χορήγηση mRNA που κωδικοποιεί τον αγγειακό ενδοθηλιακό αυξητικό παράγοντα (VEGF) έχει αποδειχθεί ότι έχει ως αποτέλεσμα λειτουργική έκφραση της πρωτεΐνης στο δέρμα, ακόμη και απουσία λιπιδικών νανοσωματιδίων70 . Σύμφωνα με τους Palmer et al71 , σε μια σύνθεση λιπιδικών νανοσωματιδίων, τα λιποσώματα αυξάνουν τη διαδερμική διέλευση των μορίων που χρησιμοποιούνται για τη θεραπεία δερματικών παθήσεων. Η διείσδυση στο δέρμα των siRNAs έχει αποδειχθεί με τη μορφή νανοφορέων, αυτά τα siRNA επιμολύνουν τα κύτταρα και εκφράζουν το στοχευόμενο γονίδιο ενδιαφέροντος. Οι νανοφορείς έχουν δοκιμαστεί για χρήση σε διαδερμικό εμβολιασμό72 .

Τα EV χρησιμοποιούνται για την παροχή θεραπειών εκτός από τα εμβόλια: κλινικές μελέτες βρίσκονται σε εξέλιξη τοπικά (περιδοντίτιδα, έλκη, βουλωσική επιδερμόλυση) και με εισπνοή (σε εξέλιξη δοκιμή κατά της νόσου του Αλτσχάιμερ)73 . Τα LNP με διπλή στιβάδα λιπιδίων μπορούν να διασχίσουν τον φραγμό του δέρματος και να μεταφέρουν γενετικό υλικό. Αυτά τα σωματίδια μπορούν να εισέλθουν στο δέρμα μέσω των τριχοθυλακίων ή απευθείας στα κερατινοκύτταρα λόγω της ομοιότητάς τους με τις κυτταρικές μεμβράνες74 .

Η ενδορρινική, από του στόματος, ενδοφθάλμια και υποεπιπεφυκότα χορήγηση EVs ικανών να μεταφέρουν φάρμακα έχει δοκιμαστεί με επιτυχία. Η ενδορινική χορήγηση αντιπροσωπεύει τη δεύτερη πιο συχνά αναφερόμενη οδό. Είναι αποτελεσματικό στη μεταφορά φαρμάκων μέσω του κεντρικού νευρικού συστήματος και των πνευμόνων. Τα περισσότερα προστατευτικά αποτελέσματα επιτεύχθηκαν ομοίως για ενδοφλέβια και ενδορινική χορήγηση. Η από του στόματος χορήγηση έχει περιγραφεί για EVs από βόειο γάλα σε μοντέλο ποντικού. Έξι ώρες μετά τη χορήγηση, τα EVs εντοπίστηκαν στο ήπαρ, την καρδιά, τον σπλήνα, τους πνεύμονες και τους νεφρούς.75 .

Τα νανοκυστίδια που παράγονται φυσικά από τα φυτά είναι μορφολογικά και λειτουργικά πανομοιότυπα με τα ανάλογα θηλαστικών τους. Μια ανασκόπηση για τα νανοκυστίδια φυτών συγκεντρώνει γνώσεις σχετικά με τους διαδερμικούς, διαμεμβρανικούς και μηχανισμούς στόχευσης αυτών των κυστιδίων. Πειράματα σε ποντίκια έδειξαν ότι είναι δυνατή η μεταφορά RNA σε όγκο εγκεφάλου μέσω αυτών των νανοκυστιδίων που εισάγονται ενδορρινικά. Αυτά τα νανοκυστίδια θα είναι επίσης σε θέση να μεταφέρουν αποτελεσματικά το ωφέλιμο φορτίο τους μέσω του δέρματος και στα κύτταρα του δέρματος.76 .

Τα LNP είναι ένας πιθανός φορέας για τη μεταφορά μορίων στον οπίσθιο θάλαμο του ματιού: έχουν επιδείξει εξαιρετικά χαρακτηριστικά οφθαλμικής διείσδυσης και δυνατότητες ενίσχυσης της διείσδυσης, ενώ παρουσιάζουν υψηλή φόρτωση φαρμάκων και αποτελεσματικότητα παγίδευσης77 .

Νανοσωματίδια σε δοκιμές εμβολιασμού και γονιδιακής θεραπείας (LNPs που περιέχουν νουκλεϊκά οξέα) μέσω της αναπνευστικής οδού.

Τα νανοσωματίδια φορτίου νουκλεϊκού οξέος είναι ικανά να διαμολύνουν κύτταρα αεραγωγών σε ζώα και ανθρώπους με τοπική χορήγηση (ενστάλαξη ή νεφελοποίηση). Το έργο DEFUSE78 , που υποβλήθηκε από την Eco Health Alliance ως απάντηση σε πρόσκληση υποβολής προτάσεων της DARPA, σχετίζεται με τη διαδερμική χορήγηση εμβολίων σε ζώα που χρησιμοποιούν νανοσωματίδια. Για θεραπευτικούς σκοπούς, η σύνθεση των LNPs έχει βελτιστοποιηθεί για πνευμονική διείσδυση με εισπνοή και έχει επαληθευτεί ότι το mRNA μεταφράζεται αποτελεσματικά στον πνεύμονα μετά την νεφελοποίηση (δοκιμάστηκε σε ποντίκια)79 .

Η ενδορρινική οδός έχει επίσης μελετηθεί για εμβολιασμό με LNPs φορτίου mRNA καθώς και για γονιδιακή θεραπεία της κυστικής ίνωσης με mRNA που ενθυλακώνονται σε LNP ​​ενδορρινικά με ενστάλαξη στα ρουθούνια ποντικών: το mRNA που επιμολύνει τα ρινικά κύτταρα εκφράζει την πρωτεΐνη ενδιαφέροντος σε κύτταρα που δεν το εξέφρασε λόγω γενετικού ελαττώματος80 .

Στους ανθρώπους, τα τοπικά χορηγούμενα λιποσωμικά νανοσωματίδια που περιέχουν DNA με νεφελοποίηση έχουν επιμολύνει κύτταρα αεραγωγών. Μια πρόσφατη δοκιμή φάσης 2b της παροχής DNA με ρυθμιστή διαμεμβρανικής αγωγιμότητας κυστικής ίνωσης (CFTR) χρησιμοποιώντας ένα σύστημα λιποσωμικής χορήγησης έδειξε ότι μετά από επαναλαμβανόμενες μηνιαίες νεφελοποιήσεις για ένα χρόνο, ομάδες ασθενών με κυστική ίνωση παρουσίασαν σταθεροποίηση της πνευμονικής λειτουργίας, ενώ η ομάδα εικονικού φαρμάκου παρουσίασε πτώση81 .

Κλινικές δοκιμές για την πρόληψη της γρίπης έδειξαν την αποτελεσματικότητα και την ασφάλεια των εισπνεόμενων εμβολίων mRNA: Το γυμνό mRNA ή mRNA τυλιγμένο σε σωματίδια λιπιδίων (ειδικά με βάση το PEG όπως στα εμβόλια mRNA κατά του Covid), μπορεί να εισπνευστεί ως αεροζόλ και να διαμολύνει το επιθήλιο του πνεύμονα κύτταρα82 . Η ενδομήτρια χορήγηση σκευασμάτων νανοσωματιδίων λιπιδίων που περιέχουν mRNA μπορεί να εφαρμοστεί για την παροχή mRNA σε έμβρυα ποντικών, με αποτέλεσμα την έκφραση πρωτεΐνης στο ήπαρ, τον πνεύμονα και το έντερο του εμβρύου[70].

Δοκιμή LNPs για διαδερμικό εμβολιασμό

Σε μια ανασκόπηση [72]σχετικά με την πιθανότητα διαδερμικού εμβολιασμού από LNPs, μαθαίνουμε ότι το μη κατεστραμμένο ανθρώπινο δέρμα είναι αδιαπέραστο από μικροσωματίδια και νανοσωματίδια, αλλά υπάρχουν ενδείξεις κάποιας δερματικής διείσδυσης σε βιώσιμους ιστούς (κυρίως στην ακανθώδη στιβάδα της επιδερμικής στιβάδας, αλλά και πιθανώς στο χόριο) για πολύ μικρά σωματίδια (λιγότερα από 10 nm). Όταν χρησιμοποιούνται πρωτόκολλα άθικτης διείσδυσης στο δέρμα, δεν υπάρχουν οριστικά στοιχεία διείσδυσης του δέρματος σε βιώσιμους ιστούς για σωματίδια με πρωτεύον μέγεθος περίπου 20 nm και άνω. Αλλά δεν υπάρχουν κατάλληλες πληροφορίες για δέρμα με μειωμένη λειτουργία φραγμού, για παράδειγμα ατοπικό δέρμα ή δέρμα με ηλιακό έγκαυμα. Λίγα δεδομένα είναι διαθέσιμα για το ψωριασικό δέρμα.

Αλλά τα νανοσωματίδια έχει αποδειχθεί ότι συσσωρεύονται σε ανοίγματα ωοθυλακίων, σμηγματογόνους αδένες ή πτυχές του δέρματος. Ένα υδατικό εναιώρημα νανοσωματιδίων καθώς και ένα σκεύασμα υδρογέλης αυτών των σωματιδίων, που εφαρμόστηκε σε δέρμα αυτιών χοίρου in vitro, διείσδυσε βαθιά στους θύλακες των τριχών. Αυτά τα σωματίδια μπορούν να απελευθερώσουν διαφορετικές ενθυλακωμένες ενώσεις οι οποίες στη συνέχεια διεισδύουν στο δέρμα.

Υπάρχουν στοιχεία στη βιβλιογραφία ότι η διαθυλακική οδός μπορεί να χρησιμοποιηθεί: τοπική εφαρμογή γυμνών φορέων έκφρασης πλασμιδίου σε άθικτο δέρμα ποντικού που προκαλείται από ειδικές για αντιγόνο ανοσοαποκρίσεις. Οι κυτταρικές αποκρίσεις και οι αποκρίσεις αντισωμάτων ειδικές για το HBsAg προκλήθηκαν με την ίδια τάξη μεγέθους με εκείνες που παράγονται με την ενδογενή έγχυση του ανασυνδυασμένου πολυπεπτιδικού εμβολίου για το HBsAg. Αντίθετα, καμία ανοσολογική απόκριση δεν μπορούσε να προκληθεί σε γυμνά ποντίκια: η παρουσία φυσιολογικών τριχοθυλακίων ήταν προϋπόθεση για την πρόκληση ανταπόκρισης. Τα σωματίδια είχαν μέγεθος περίπου 150 nm. Τα LNP των εμβολίων mRNA είναι μεταξύ 100 και 400 nm [22] .

Ένα σύστημα που έχει δοκιμαστεί κλινικά διαδερμικά είναι το έμπλαστρο DermaVir HIV-1/AIDS. Περιέχει ένα εμβόλιο πλασμιδικού DNA (pDNA) που κωδικοποιεί όλα τα κύρια αντιγόνα HIV-1 και για το σχηματισμό σωματιδίων που μοιάζουν με ιούς. Το pDNA διαμορφώνεται ως νανοσωματίδια μαννοζυλιωμένης πολυαιθυλενοϊμίνης παρόμοια με παθογόνο (80-400 nm). Σε αυτή τη μελέτη συμμετείχαν 12 άτομα που ανοσοποιήθηκαν με το εμβόλιο: ανέπτυξαν υψηλότερα και ευρύτερα επίπεδα CD8+ Τ κυττάρων σε σύγκριση με το εικονικό φάρμακο, αν και δεν είχε καμία επίδραση στον αριθμό των CD4+ Τ κυττάρων [72] .

Το γυμνό RNA θα μπορούσε επίσης να χρησιμοποιηθεί με δερματική διέλευση και εισπνοή

Τα ολιγονουκλεοτίδια RNA μπορούν να διεισδύσουν στο άθικτο δέρμα και να διατηρήσουν τη βιολογική τους δραστηριότητα, η διείσδυση μέσω του δέρματος δεν εξαρτάται από το μέγεθος του μορίου που μελετήθηκε (12,5 έως 29,3 kDA)83 . Η σκοπιμότητα του εισπνεόμενου RNA για παθητική επιμόλυνση έχει επίσης αποδειχθεί σε πολλές μελέτες. Το εισπνεόμενο RNA μπορεί να οδηγήσει σε πρωτεϊνική σύνθεση ακίδας μετά τη διαμόλυνση και έτσι οδηγεί σε ανοσοποίηση του ατόμου84 .

Θεραπευτικοί και εμβολιακοί LNP στον COVID-19

Δεδομένου ότι τα LNP των εμβολίων είναι συνθετικά EVs, δεν προκαλεί έκπληξη το γεγονός ότι τα θεραπείες για τον COVID και τα εμβόλια με φυσικά EV που χρησιμεύουν ως φορείς βρίσκονται σε πειραματισμό. Η νεφελοποίηση των EV για θεραπεία εισπνοής έχει δοκιμαστεί για COVID-19. Επί του παρόντος, περισσότερες από εξήντα κλινικές δοκιμές βρίσκονται σε εξέλιξη για τη μελέτη των επιδράσεων των MSCs (μεσεγχυματικά βλαστοκύτταρα) και των EVs (που περιέχουν αυτά τα MSCs) σε ασθενείς με COVID-19. Ολοκληρώθηκε μια κλινική δοκιμή φάσης 1 για την αξιολόγηση της ασφάλειας και της αποτελεσματικότητας των εισπνεόμενων EV που προέρχονται από αλλογενή λιπώδη MSCs για τη θεραπεία της πνευμονίας COVID-19. Τρεις κλινικές δοκιμές χρησιμοποιούν το αεροζόλ ως οδό χορήγησης. Το 2022,85 .

Φυσικά εμβόλια εξωσώματος κατά του SARS-CoV-2: πελματιαία οδός ή εισπνοή

Τα εμβόλια που βασίζονται σε EV που φέρουν mRNA έχουν εξεταστεί κατά του SARS-CoV-286 . Δοκιμές εμβολίων που εγχύθηκαν ως EV στο πέλμα ποντικών έδειξαν επαγωγή αντισωμάτων κατά της ακίδας87 . Οι φορείς EV του RBD (δεσμευτική περιοχή) της ακίδας είναι ικανοί να προκαλέσουν τη διείσδυση του αντιγόνου με νεφελοποίηση και εισπνοή στα κύτταρα του πνεύμονα των ποντικών και να προκαλέσουν ανοσοαπόκριση. Πρόκειται για σωματίδια παρόμοια με τους ιούς (VLP-Virus Like Particles) που λαμβάνονται φυσικά από πνευμονικά κύτταρα και τα οποία μεταφέρουν το RNA του μητρικού κυττάρου τους καθώς και διάφορες πρωτεΐνες που εκφράζονται στην επιφάνειά τους.88 . Επίσης με εισπνοή, τα EVs που περιέχουν πρωτεΐνη ακίδας mRNA είναι ικανά να ανοσοποιήσουν ποντίκια ή μη ανθρώπινα πρωτεύοντα κατά του SARS-CoV-2 και τα φυσικά EVs είναι πιο αποτελεσματικά από τα συνθετικά EV89 .

Παρατηρήσεις που έγιναν μετά τη μαζική εκστρατεία εμβολιασμού που μπορεί να υποστηρίξει την απόρριψη εμβολίων

Οι επιστήμονες συνέκριναν μη εμβολιασμένα παιδιά που ζουν με μη εμβολιασμένους γονείς με παιδιά επίσης ανεμβολίαστα αλλά που ζουν με εμβολιασμένους γονείς. Παιδιά εμβολιασμένων γονέων έχουν αντι-Covid IgG στη μύτη και η διαφορά με τα παιδιά μη εμβολιασμένων γονέων είναι σημαντική. Οι συγγραφείς πιστεύουν ότι αυτό οφείλεται στην απέκκριση αντισωμάτων από τα σταγονίδια: αυτό που μεταφέρεται θα είναι το ίδιο το αντίσωμα IgG στα σταγονίδια του σάλιου90 . Αλλά είναι πιθανό τα παιδιά να αναπτύξουν ενδορινική IgG επειδή άλλα υποπροϊόντα εμβολίου ή εξωσώματα απεκκρίνονται από τους εμβολιασμένους γονείς τους. Αυτό μπορεί να οφείλεται σε νανοσωματίδια λιπιδίων mRNA που θα μπορούσαν να απεκκριθούν και να μεταφερθούν μέσω του σάλιου, των πτυέλων ή του δέρματος. Τα παιδιά θα ανέπτυξαν μια ανοσολογική αντίδραση στα νανοσωματίδια (ή στα υποπροϊόντα του εμβολίου) αντί τα IgG να μεταφέρονται απευθείας από τους γονείς στα παιδιά. Τα αντισώματα που αναζητούνται είναι IgG και IgA κατά του RBD της ακίδας και όχι κατά του νουκλεοκαψιδίου του ιού, είναι κρίμα γιατί οι συγγραφείς ανέπτυξαν τους 2 τύπους δοκιμής91 : αυτό δεν καθιστά δυνατή τη διάκριση των παιδιών που θα είχαν φυσικά μολυνθεί από τον ιό (και θα είχαν αντισώματα anti-RBD και anti-N) από παιδιά που θα είχαν αναπτύξει αντισώματα μετά τον εμβολιασμό των γονιών τους (και δεν θα έχουν μόνο αντι-RBD και όχι αντι-Ν επειδή δεν προκαλείται από το εμβόλιο).

συμπέρασμα

Υπάρχουν πολλές μαρτυρίες μη εμβολιασμένων ατόμων που παρουσίασαν συμπτώματα πανομοιότυπα με τις ανεπιθύμητες ενέργειες του εμβολίου μετά από επαφή με πρόσφατα εμβολιασμένα άτομα.

Μια μελέτη δείχνει υπερβολική θνησιμότητα σε μη εμβολιασμένες ηλικιακές ομάδες κατά την έναρξη των εκστρατειών εμβολιασμού, η οποία θα μπορούσε να εξηγηθεί από ένα φαινόμενο μετάδοσης του εμβολίου ή των προϊόντων του.

Είναι σημαντικό να μην παραμελήσουμε αυτές τις μαρτυρίες γιατί οι απαιτούμενες μελέτες φαρμακοκινητικής και ειδικότερα της απέκκρισης του εμβολίου και των προϊόντων του δεν έχουν πραγματοποιηθεί παρά τους κανονισμούς που ισχύουν για τις γονιδιακές θεραπείες, οι οποίες περιλαμβάνουν εμβόλια mRNA σύμφωνα με τον ορισμό αυτών των γονιδίων. προϊόντα. Επιπλέον, η αμφιβολία για την πιθανή μετάδοση του εμβολίου δημιουργεί ένα ανθυγιεινό κλίμα καχυποψίας των μη εμβολιασμένων προς τους εμβολιασμένους : μια διευκρίνιση επομένως θα ήταν ευπρόσδεκτη. Τα εμβόλια βασίζονται όλα στην πρωτεΐνη ακίδας, αφού αναγνωρίζεται ως η κύρια υπεύθυνη για την παθογένεια του ιού SARS-CoV-2:Εάν είναι δυνατή η μετάδοση του εμβολίου ή της ακίδας, είναι λογικό να βρεθούν οι δυσμενείς επιπτώσεις του εμβολίου σε μη εμβολιασμένα άτομα σε επαφή με εμβολιασμένα άτομα.

Λίγα είναι γνωστά για τη φαρμακοκινητική του εμβολίου. Τα LNP του εμβολίου είναι πολύ παρόμοια με τα φυσικά EV ή τα εξωσώματα, τη δομή και τη λειτουργία των οποίων οι επιστήμονες προσπάθησαν να μιμηθούν όσο το δυνατόν περισσότερο. Σύμφωνα με τις λίγες μελέτες που πραγματοποιήθηκαν από κατασκευαστές και ανεξάρτητους ερευνητές, τα LNP από τα εμβόλια mRNA κυκλοφορούν στο αίμα και συσσωρεύονται στον σπλήνα και το συκώτι σε ποντίκια (και σε μικρότερο βαθμό σε πολλά όργανα, συμπεριλαμβανομένων των ωοθηκών και των όρχεων, του μυελού των οστών κ.λπ. ). Η μετάφραση σε πρωτεΐνη ακίδας επιμένει για 6 έως 10 ημέρες στα ποντίκια στο σημείο της ένεσης και 8 ημέρες στους μύες.

Η οδός απέκκρισης των LNP ποικίλλει ανάλογα με το μέγεθός τους, στην περίπτωση των LNP από εμβόλια mRNA η απέκκριση αναμένεται να γίνει κυρίως μέσω των κοπράνων αλλά και μέσω των ούρων. Τα ποσοτικά αποτελέσματα αυτών των μελετών υποδηλώνουν ότι θα πρέπει να διερευνηθούν οι οδοί απέκκρισης εκτός από τα κόπρανα και τα ούρα. Μελέτες πριν από τα εμβόλια mRNA υποδηλώνουν ότι η απέκκριση των EVs είναι δυνατή μέσω του σάλιου, του ιδρώτα και του μητρικού γάλακτος. Μελέτες έχουν δείξει ότι είναι πολύ πιθανό τα νανοσωματίδια μεγέθους συγκρίσιμου με αυτά που χρησιμοποιούνται για τα εμβόλια mRNA να είναι ικανά για διαπλακουντιακή διέλευση στους ανθρώπους. Τα νανοσωματίδια (VEs) υπάρχουν φυσικά σε όλα τα σωματικά υγρά (συμπεριλαμβανομένων των πτυέλων, σάλιο και ιδρώτα) και στα κερατινοκύτταρα και μπορούν να μεταφέρουν νουκλεϊκά οξέα τα οποία έτσι προστατεύονται από τις νουκλεάσες. Ορισμένοι τύποι RNA (miRNA) επιλέγονται επιλεκτικά και εμπλουτίζονται σε EVs ιδρώτα από αίμα.

Δεν βρέθηκαν μελέτες σχετικά με την πιθανότητα διέλευσης LNP στο σπέρμα. Δεδομένης της βιοκατανομής σε όλα τα όργανα και τα υγρά, μια τέτοια δίοδος είναι a priori δυνατή και θα πρέπει να διερευνηθεί.

Το ιικό RNA πολλών ιών υπάρχει στο αίμα, τις εκκρίσεις και τους ιστούς. Το mRNA του εμβολίου εγχέεται σε ποσότητες πολλές φορές μεγαλύτερες από το ιικό RNA που παράγεται κατά τη φυσική μόλυνση. Αυτό το mRNA βρίσκεται στο αίμα από την πρώτη ημέρα μετά την ένεση και παραμένει για έως και 15 ημέρες, είναι σε θέση να διαφύγει από τα LNP και να ενθυλακωθεί σε EV, είναι λειτουργικό και μπορεί να μεταφραστεί σε πρωτεΐνη. Το γυμνό ή EV-ενθυλακωμένο mRNA εμβολίου βρίσκεται στο μητρικό γάλααπό την πρώτη εβδομάδα μετά την ένεση. προστατεύεται από τα γαστρικά υγρά και μπορεί να επιμολύνει νεογνικά κύτταρα. Το RNA που ενσωματώνεται σε EV ή ακόμη και γυμνό είναι ικανό να διαμολύνει κύτταρα με εισπνοή ή διαδερμική διέλευση. Η ενδορρινική, στοματική, διαδερμική ενδοφθάλμια και υποεπιπεφυκότα χορήγηση EVs που φέρουν φάρμακα έχει δοκιμαστεί: Τα LNPs μπορούν να χορηγηθούν δερματικά, ενδορινικά, ενδοεπιπεφυκότα και με εισπνοή. πειράματα έχουν δείξει ότι το mRNA που περιλαμβάνεται σε αυτά τα LNPs είναι ικανό να επιμολύνει κύτταρα. Δοκιμές εμβολιασμού κατά του COVID με εισπνοή EVs που περιέχουν mRNA ή ακίδα έχουν δείξει θετικά αποτελέσματα σε ποντίκια και πρωτεύοντα πλην του ανθρώπου. Τα φυσικά EV είναι πιο αποτελεσματικά από τα συνθετικά EV.

Η πρωτεΐνη ακίδας που μεταφράζεται από το mRNA του εμβολίου παραμένει για μήνες σε μεγάλες ποσότητες στους εμβολιασμένους. βρίσκεται σε ελεύθερη μορφή στο πλάσμα και ενθυλακώνεται σε EV που σχηματίζονται αυθόρμητα από τα κύτταρα όπου παρήχθη. Αυτά τα EV μπορούν να παραδώσουν το φορτίο τους σε διαφορετικούς τύπους κυττάρων, ιδιαίτερα σε εμβρυϊκά κύτταρα από εμβολιασμένες μητέρες. Η ακίδα μπορεί να βρεθεί στα κερατινοκύτταρα του δέρματος. Ειδικά κατά των κοροναϊών, οι δοκιμές γονιδιακής θεραπείας και εμβολιασμού (ειδικά με mRNAs) έχουν δείξει τη δυνατότητα επιμόλυνσης κυττάρων διαδερμικά, ρινικά και με νεφελοποίηση από LNPs και ακόμη και γυμνά mRNA.

Όλες αυτές οι μελέτες δείχνουν ότι τα EVs που φέρουν mRNA και ακίδα θα μπορούσαν επομένως να απεκκριθούν από διαφορετικά σωματικά υγρά και θα μπορούσαν να διεισδύσουν μέσω του δέρματος ή με εισπνοή σε μη εμβολιασμένα άτομα (καθώς και μέσω του μητρικού γάλακτος σε βρέφη και μέσω της διαπλακουντιακής διέλευσης στα έμβρυα και γιατί όχι από το σπέρμα ). Το γυμνό mRNA θα μπορούσε επίσης να απεκκριθεί και να διεισδύσει.

Τα εμβόλια mRNA (και οι αδενοϊοί) αντιστοιχούν ακριβώς στον ορισμό της γονιδιακής θεραπείας που δίνεται από τις υπηρεσίες υγείας (FDA, NIH και EMA). Σύμφωνα με τους κανονισμούς αυτών των οργανισμών, τα προϊόντα αυτά θα πρέπει να υποβληθούν επειγόντως σε πρόσθετες φαρμακοκινητικές μελέτες (ειδικά μελέτες απέκκρισης), καθώς φαίνεται να επικρατεί η γενίκευση της τεχνολογίας mRNA.

Πράγματι, η Sanofi ξεκινά την κλινική δοκιμή του πρώτου υποψηφίου εμβολίου εποχικής γρίπης που βασίζεται σε mRNA92 και η Moderna λανσάρουν τη φάση 3 δοκιμή εμβολίου γρίπης που βασίζεται σε mRNA93 . Για αυτά τα εμβόλια κατά της γρίπης, δεν θα πρέπει να ισχύει η άδεια έκτακτης ανάγκης και δεν θα πρέπει να γίνεται υπέρβαση της υποχρέωσης αυτών των πρόσθετων μελετών.

To Mytilenepress είναι το μοναδικό ελεύθερο ιστολόγιο σε όλο το Αιγαίο και την Θράκη. Αυτό φαίνεται από την θεματολογία στα εθνικά θέματα, τις γεωστρατηγικές αναλύσεις, την υγεία τις διεθνείς εξελίξεις και τα άρθρα ειδικής παιδείας. Τα άρθρα αυτά δεν υπάρχουν σε καμία άλλη ιστοσελίδα, από τις προαναφερόμενες περιοχές. 

Στην πιο κρίσιμη ιστορικά στιγμή για τον Ελληνισμό εάν θέλετε να συνεχιστεί η προσπάθεια μας, υποστηρίξετε με τρεις συγκεκριμένους τρόπους. Διαβάστε εδώ τους τρόπους υποστηρίξεως (mytilenepress).  «Διαφωνώ με αυτό που λες, αλλά θα υπερασπιστώ μέχρι θανάτου το δικαίωμά σου να το λες», όπως είπε ο Βολταίρος. Για αυτό με βάση αυτό το αξίωμα και στα πλαίσια της πραγματικής δημοκρατίας, στο Mytilenepress δημοσιεύονται όλες οι απόψεις.

Mytilenepress. Eπιμέλεια άρθρου  Άγγελος-Ευάγγελος Φ. Γιαννόπουλος Γεωστρατηγικός-Γεωπολιτικός αναλυτής.

πηγή: AIMSIB